تحليل الصيدلة الشبكية والتحقق التجريبي من الأهداف المرتبطة بسرطان المعدة لهارمين

يُعد الهارمين (HM)، وهو القلويد الطبيعي من نوع بيتا-كاربولين المستخلص من نبات Peganum harmala، مركباً ذو تأثيرات صيدلانية متعددة تشمل مضادات الالتهاب، الحماية العصبية، مضاد لمرض السكري، ومضاد للأورام. ومع ذلك، تبقى الأهداف المحتملة التي يشارك بها في آثاره العلاجية على سرطان المعدة (GC) غير واضحة. في هذه الدراسة، تم التحقيق في التأثيرات المضادة لسرطان المعدة للهارمين وتم تحديد HSP90AA1 كهدف جزيئي له. أوضحت التجارب المخبرية أن الهارمين يثبط بشكل كبير تكاثر، وهجرة، وغزو خلايا سرطان المعدة ويحفز موت الخلايا المبرمج. ومن خلال دمج البيانات من قواعد بيانات متعددة ومن تحليلات السحب الطولي والطيف الكتلي، تم تحديد 25 هدفاً رئيسياً مرتبطاً بسرطان المعدة. تم بناء شبكة تفاعل البروتين-بروتين (PPI) وتم تحديد عشرة أهداف مركزية باستخدام خوارزمية المركزية العظمى للكليك (MCC). كشف التحليل الوظيفي للإثراء عن العمليات البيولوجية والمسارات ذات الصلة، مسلطاً الضوء على آلية مضادة للسرطان متعددة الأهداف للهارمين. أدى تحليل الإرساء الجزيئي لتفاعلات الهارمين مع الأهداف العشرة الأساسية إلى اختيار HSP90AA1 كمرشح لمزيد من الدراسة. أظهرت تحاليل PCR في الوقت الحقيقي الكمي (RT-qPCR) وتحليل الوسترن (WB) انخفاضًا ملحوظًا في مستويات التعبير للـ HSP90AA1 عند علاج خلايا سرطان المعدة بالهارمين. كشف صبغ التألق المناعي عن تعبير عالي لبروتين HSP90AA1 في أنسجة الأورام للمجموعة المعالجة بالهارمين في نموذج زرع الأورام في الفئران. تم تأكيد العلاقة الالتصاقية المعتدلة بين الهارمين وHSP90AA1 باستخدام تحاليل الرنين البلازموني السطحي (SPR) والديناميكا الحرارية النانوية (MST)، مما يدعم أن HSP90AA1 هو هدف ارتباط رئيسي للهارمين في سرطان المعدة. لتوضيح الدور الوظيفي لـ HSP90AA1، تم استخدام lentivirus لنقل RNA صغير متداخل (siRNA) لتقليل تعبير HSP90AA1 في خلايا سرطان المعدة، وفُحصت استجاباتها الوظيفية لاحقًا لعلاج الهارمين. أظهرت النتائج أن تقليل تعبير HSP90AA1 ثبط تكاثر وهجرة وغزو خلايا سرطان المعدة. أدى العلاج المشترك بالهارمين وتقليل HSP90AA1 إلى زيادة تثبيط الهجرة، لكن لم تُلاحظ تأثيرات تآزرية كبيرة على التكاثر أو الغزو. في الختام، توضح نتائج هذه الدراسة أن الهارمين يمتلك تأثيرات مضادة مهمة على سرطان المعدة، وتم تحديد HSP90AA1 كهدف ارتباط حاسم يوسط النشاط المضاد للورم للهارمين. توفر هذه النتائج رؤى مهمة للتطبيق العلاجي المحتمل للهارمين في سرطان المعدة وتدعم المزيد من الأبحاث في استراتيجيات العلاج المخصصة.