Isolation und Charakterisierung von Exosomen aus Zellkulturüberständen und biologischen Flüssigkeiten

Exosome sind kleine Membranvesikel, die in Zellkulturüberständen und in verschiedenen biologischen Flüssigkeiten vorkommen. Exosome bilden sich in einer bestimmten Population von Endosomen, die als multivesikuläre Körper (MVBs) bezeichnet werden, durch nach innen gerichtetes Knospung in das Lumen des Kompartiments. Bei der Fusion von MVBs mit der Plasmamembran werden diese intrazellulären Vesikel sekretiert. Exosome besitzen einen definierten Satz von Membran- und zytosolischen Proteinen. Die physiologische Funktion von Exosomen ist nach wie vor umstritten, aber zunehmende Ergebnisse in verschiedenen experimentellen Systemen deuten auf ihre Beteiligung an mehreren biologischen Prozessen hin. Da sowohl Zellkulturüberstände als auch biologische Flüssigkeiten verschiedene Arten von Lipidmembranen enthalten, ist es entscheidend, eine hochqualitative Exosomenreinigung durchzuführen. Diese Einheit beschreibt verschiedene Ansätze zur Exosomenreinigung aus verschiedenen Quellen und erörtert Methoden zur Bewertung der Reinheit und Homogenität der gereinigten Exosomenvorbereitungen.