Peptidfraktionierung aus Cissus quadrangularis mittels Gefrier-Tau-Methode und deren antimikrobielle Anwendungen

Ziel dieser Studie war es, bioaktive Peptide aus Cissus quadrangularis (L.) zu isolieren und zu charakterisieren sowie deren antimikrobielle Aktivität zu bewerten. Das Pflanzenmaterial wurde bei 37°C getrocknet, pulverisiert und bei −20°C gelagert. Peptide wurden mittels Phosphat-gepufferter Kochsalzlösung (pH 7,2) und Tris-NaCl-Puffer (pH 7,4) extrahiert, gefolgt von Homogenisierung und Gefrier-Tau-Zyklen zur effektiven Zellzerstörung. Der Extrakt wurde durch Zentrifugation und Filtration geklärt, Proteine mittels 80% Ammoniumsulfat ausgefällt. Das Pellet wurde rehydriert, dialysiert (1–3 kDa Cut-off) und lyophilisiert. Eine weitere Reinigung durch HPLC ergab einen ausgeprägten Peak bei 3,16 Minuten. Die Peptidkonzentration, bestimmt durch den Bradford-Assay, stieg während der Reinigung auf 80,7 µg/mL an. SDS-PAGE bestätigte Peptide mit geringem Molekulargewicht (3–10 kDa). Die antimikrobielle Aktivität wurde mittels Agar-Well-Diffusionsmethode gegen Staphylococcus aureus, Bacillus subtilis, Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae und Citrobacter freundii getestet. Die Peptide zeigten starke Hemmung gegen Gram-positive Bakterien, insbesondere S. aureus und B. subtilis, mit schwächeren Effekten bei Gram-negativen Stämmen. Diese Ergebnisse heben Cissus quadrangularis als vielversprechende natürliche Quelle antimikrobieller Peptide hervor.