Résumé A012 : Inhibition combinée de AXL et KRAS synergique induisant le recrutement immunitaire dans le NSCLC mutant KRAS

Résumé Les mutations KRAS surviennent dans 20-30 % des NSCLC. Les inhibiteurs allèle-spécifiques de KRAS induisent des réponses chez une minorité de patients, généralement de courte durée, principalement en raison de la réactivation rapide de la voie MAPK. Cela souligne l'importance d'identifier des traitements combinatoires prolongeant la suppression MAPK et améliorant l'activité anti-tumorale. AXL est une RTK de la famille TAM impliquée dans la progression, l'évasion immunitaire et la résistance, ciblable par l'inhibiteur en phase clinique bemcentinib. Dans cette étude, nous avons réalisé un criblage CRISPRa in vivo pour identifier des médiateurs de résistance à la thérapie ciblant KRAS et évalué si l'inhibition simultanée de KRAS et AXL améliore la suppression MAPK et augmente l'immunité anti-tumorale dans le NSCLC mutant KRAS. MéthodesNous avons conduit un criblage CRISPRa autochtone in vivo dans un modèle Kras-G12D ; P53 du NSCLC en utilisant une bibliothèque sgRNA poolée ciblant 442 gènes fréquemment altérés sous sélection avec MRTX1133 (inhibiteur KRAS-G12D). Les candidats identifiés ont été validés dans des lignées cellulaires murines et humaines par immunoblot, pull-down RBD, RNA-seq en vrac, essais clonogéniques et analyses de synergie. L'activité thérapeutique a été testée dans un modèle syngénique sous-cutané, et les effets sur le microenvironnement immunitaire ont été évalués. RésultatsDans notre criblage CRISPRa in vivo, AXL a été identifié comme le meilleur candidat chez les souris traitées avec MRTX1133. Nous avons observé une augmentation de la phosphorylation d'AXL concomitante à la réactivation MAPK in vitro et dans des cellules avec résistance acquise. L'inhibition combinée de KRAS et AXL (MRTX1133 + bemcentinib) a prolongé la suppression MAPK, indiquée par la réduction de phospho-ERK, DUSP6 et MYC, ainsi que la régulation à la baisse des transcrits MAPK-dépendants. Le pull-down du RAS actif a montré que la combinaison supprime davantage la réactivation de KRAS. Le profil transcriptomique a révélé une suppression plus forte des voies avec la thérapie combinée, avec des scores d'activité de la voie MAPK significativement plus bas. In vitro, la combinaison a montré une forte synergie et une réduction du potentiel clonogénique dans la majorité des lignées NSCLC mutantes KRAS. In vivo, la thérapie combinée a significativement limité la croissance tumorale sans toxicité supplémentaire et a maintenu la suppression MAPK dans la plupart des tumeurs, tandis que toutes les tumeurs traitées uniquement par MRTX1133 présentaient une coloration phospho-ERK. Nous avons constaté une augmentation de la signalisation de l'interféron, une expression accrue de CXCL9/10, une infiltration plus importante de lymphocytes T, et une élévation de l'expression Fas/FasL dans les tumeurs traitées par combinaison, soutenant collectivement le recrutement amélioré des lymphocytes T et la cytotoxicité médiée par Fas. DiscussionCes données identifient AXL comme médiateur critique de résistance adaptative à l'inhibition de KRAS et démontrent que la combinaison des inhibitions KRAS et AXL induit une suppression prolongée de la voie MAPK associée à une restriction de la croissance tumorale et une modulation immunitaire. Bien que MRTX1133 ne soit plus en développement, une synergie similaire avec les inhibiteurs ciblant G12C et les inhibiteurs pan-KRAS émergents suggère une applicabilité étendue. Ce travail met en lumière le ciblage KRAS/AXL comme stratégie thérapeutique prometteuse et illustre l'utilité du criblage CRISPRa in vivo pour découvrir des combinaisons exploitables. L'IA a été utilisée pour améliorer la clarté de ce résumé. Format de citation : Fredrik I. Thege, Annaliese Kramer, Amber Hoskins, Ashwath Seetharaman, Yuki Makino, Kimal Rajapakshe, Sonja M. Woermann, Anirban Maitra. Combined AXL and KRAS inhibition synergize and drive immune recruitment in KRAS-mutant NSCLC abstract. In: Proceedings of the AACR Special Conference in Cancer Research: RAS Oncogenesis and Therapeutics; 2026 Mar 5-8; Los Angeles, CA. Philadelphia (PA): AACR; Cancer Res 2026;86 (5Suppl₁): Abstract nr A012.