Ranpirnase (RNase de grenouille) ciblé par un anticorps humanisé, internalisant, anti–Trop-2, présente une cytotoxicité puissante contre diverses cellules cancéreuses épithéliales

Ranpirnase (Rap), une RNase amphibienne, a été largement étudiée tant précliniquement que cliniquement comme agent antitumoral. Rap peut être administré de manière répétée aux patients sans réponse immunitaire indésirable, la toxicité rénale réversible ayant été rapportée comme limitant la dose. Pour améliorer sa puissance et la thérapie tumorale ciblée, nous décrivons la génération d'un nouvel immunotoxine basé sur l'IgG, dénommé 2L-Rap(Q)-hRS7, comprenant Rap(Q), une Rap mutante avec le site putatif de N-glycosylation supprimé, et hRS7, un anticorps internalisant, humanisé, contre Trop-2, une glycoprotéine de surface cellulaire surexprimée dans diverses formes de cancers épithéliaux. L'immunotoxine a été générée de manière recombinante en fusionnant Rap(Q) à chacune des deux chaînes légères (L) de hRS7 au niveau du terminus NH(2), produite dans des cellules myélomateuses transfectées de façon stable, purifiée par Protein A, et évaluée par une série d'études in vitro. Les résultats, incluant chromatographie liquide haute performance par exclusion de taille, SDS-PAGE, cytométrie en flux, activité RNase, internalisation, viabilité cellulaire et formation de colonies, ont démontré sa pureté, son intégrité moléculaire, une affinité comparable à celle de hRS7 pour la liaison à plusieurs lignées cellulaires exprimant Trop-2 de différentes types de cancer, et sa puissance pour inhiber la croissance de ces lignées cellulaires à des concentrations nanomolaires. De plus, 2L-Rap(Q)-hRS7 a supprimé la croissance tumorale dans un modèle prophylactique de souris nues portant des xénogreffes Calu-3 de cancer du poumon non à petites cellules humain, avec une augmentation du temps médian de survie de 55 à 96 jours (P < 0,01). Ces résultats justifient le développement ultérieur de 2L-Rap(Q)-hRS7 en tant que thérapeutique potentiel pour divers cancers exprimant Trop-2, comme les cancers du col de l'utérus, du sein, du côlon, du pancréas, de l'ovaire et de la prostate.