ハイスループットのサイクリック免疫蛍光法を用いた単一細胞の高多重イメージング

単一細胞解析は、特に複数のシグナル伝達、分化および細胞運命マーカーのレベルを相関させることが可能な質量細胞計測法（CyTOF）などの高度多重解析法において、集団ベースの研究からは明らかでない細胞生理学の側面を明らかにします。免疫蛍光（IF）顕微鏡法は、フロー法では得られない細胞形態や微小環境の情報を加えますが、従来のIFの多重度は限られています。これにより、特殊な機器や特殊試薬、または多くの研究室で再現が困難な独自のプロトコルを必要とするイメージング法の開発が促されました。ここでは、4色染色を蛍光体の化学的不活性化と交互に実施して多チャネル画像を段階的に構築する、シンプルで多用途なサイクリック免疫蛍光（CycIF）を用いた高多重単一細胞IFの公共領域メソッドを報告します。CycIFは標準的な試薬と機器を用い、従来のIFと同程度のコストであるため、高スループットアッセイやスクリーニングに適しています。