मक्का के बीजों में एक्ससरोहिलम टर्किसियम का आणविक जाँच: विशिष्ट प्राइमरों का सत्यापन और पीसीआर / क्यूपीसीआर प्रोटोकॉल का विकास

सारांश उत्तरी मक्का की पत्तियों का झुलसा, मक्का (ज़िया मेयस) की सबसे विनाशकारी बीमारियों में से एक है, जो एक्ससरोहिलम टर्किसियम द्वारा होता है। यह रोगकारक व्यापक रूप से वितरित होता है और दुनिया के अधिकांश क्षेत्रों में मक्का के खेतों में पाया जा सकता है। बीजों के साथ रोगकारकों का जुड़ाव खेत की स्थापना के लिए एक गंभीर खतरा माना जाता है क्योंकि बीजों को रोगकारकों के जीवित रहने और फैलने का एक महत्वपूर्ण भंडार माना जाता है। बीज-जनित रोगकारकों की त्वरित पहचान और मात्रात्मक मूल्यांकन उनके उत्पादन क्षेत्रों में प्रवेश को रोकता है। इस अध्ययन ने विशिष्ट प्राइमरों का सत्यापन किया और मक्का के बीजों में E. टर्किसियम की नियमित पहचान के लिए एक cPCR/qPCR प्रोटोकॉल स्थापित किया। बीजों को विभिन्न समय अवधि के लिए कवक कॉलोनी के संपर्क में रखा गया: 36, 72, 108 और 144 घंटे। बाद में, संक्रमित बीजों को स्वस्थ बीजों के साथ मिलाया गया ताकि 400 मक्का बीजों के नमूनों में 0.25%, 0.5%, 1%, 10% और 100% की स्तर की घटना प्राप्त की जा सके। प्राइमर सेट ने E. टर्किसियम से 170 bp का उत्पाद संचारित किया और अन्य कवक का किसी भी DNA को संचारित नहीं किया। दोनों तकनीकों ने बीजों में कवक को प्रभावी ढंग से पहचाना। सबसे उच्च स्तर की संवेदनशीलता cPCR और qPCR तकनीकों का उपयोग करते हुए बीजों को कवक कॉलोनी के संपर्क में लाने पर 36 घंटे में 0.5% की घटना पर हासिल की गई। यह क्यूपीसीआर तकनीक के उपयोग से 0.0000147 ng/μL के बराबर है। इसलिए, प्राइमर जोड़ी मक्का के बीजों में E. टर्किसियम की पहचान के लिए cPCR और qPCR प्रोटोकॉल में प्रभावी थी, और इसका उपयोग नियमित बीज स्वास्थ्य विश्लेषण के लिए किया जा सकता है।