Resumo 4005: Inibidores de tirosina quinase HER2 potencializam a atividade antitumoral das células CAR-T e CAR-NK direcionadas ao HER2 contra NSCLC

Resumo Aproximadamente 3% dos casos de câncer de pulmão de não pequenas células (NSCLC) apresentam mutações em ERBB2/HER2. Notavelmente, a maioria das mutações acionáveis em HER2 no NSCLC são inserções em quadro no éxon 20. Abordagens atuais direcionadas a HER2, incluindo conjugados anticorpo-droga (ADCs) como trastuzumabe deruxtecana, mostraram taxas de resposta promissoras. Para explorar estratégias novas para direcionar NSCLC HER2-positivo, investigamos terapias baseadas em receptores quiméricos de antígeno (CAR) para potencializar a atividade antitumoral das células efetoras imunes. Projetamos uma série de construtos CAR para HER2 utilizando scFvs derivados de trastuzumabe, pertuzumabe e FRP5, que reconhecem domínios distintos do HER2. Estes scFvs foram integrados em CARs de segunda geração BB3z (com domínios intracelulares 4-1BB e CD3z) e de terceira geração 28BB3z (com CD28, 4-1BB e CD3z), que foram subsequentemente transduzidos em células T ativadas e células natural killer (NK) para gerar células CAR-T e CAR-NK, respectivamente. Altas eficiências de transdução foram alcançadas, com mais de 80% em células CAR-T e mais de 50% em células CAR-NK. Avaliamos então a atividade contra um painel de linhas celulares de NSCLC expressando níveis variados de HER2 in vitro utilizando ensaios de luciferase de vaga-lume. Todas as células CAR-T HER2 demonstraram mais de 90% de citotoxicidade contra H2170 (HER2 alto) e H322 (HER2 médio) na relação efector:alvo (E:T) de 10:1, enquanto células CAR-T HER2 apresentaram efeito citotóxico de 35% contra células A549 (HER2 baixo). Células CAR-NK direcionadas a HER2 também exibiram citotoxicidade potente contra células NSCLC expressando HER2. Além disso, observamos que o tratamento de células NSCLC mutantes ou com amplificação de HER2 com baixas doses de inibidores de tirosina quinase HER2 (TKIs) como poziotinibe aumentou a expressão de HER2 na superfície celular. Essa regulação para cima resultou em ativação aumentada das células CAR-T e CAR-NK HER2 em experimentos de cocultura, medida pela expressão de CD107a nas células efetoras. Adicionalmente, o tratamento com o HER2 TKI poziotinibe potencializou a atividade citotóxica mediada pelas células CAR-T e CAR-NK HER2. Usando um modelo de xenotransplante derivado de paciente (PDX) de NSCLC com duplicação HER2 YVMA, observamos que a combinação in vivo de poziotinibe com células CAR-NK HER2 exibiu atividade antitumoral superior comparada ao tratamento isolado com poziotinibe. Em conclusão, células CAR-T e CAR-NK HER2 direcionam efetivamente NSCLC mutante e HER2-positivo, e sua combinação com HER2 TKIs aumenta a vulnerabilidade às estratégias direcionadas ao HER2. Formato da citação: Yan Yang, Monique B. Nilsson, Alissa Poteete, Junqin He, Qian Huang, John V. Heymach. HER2 TKIs enhance the anti-tumor activity of HER2-targeting CAR-T and CAR-NK cells against NSCLC abstract. In: Proceedings of the American Association for Cancer Research Annual Meeting 2024; Part 1 (Regular Abstracts) ; 2024 Apr 5-10; San Diego, CA. Philadelphia (PA): AACR; Cancer Res 2024;84 (6Suppl): Abstract nr 4005.