Validação de um ensaio ELISA para medição do metabólito da serotonina, ácido 5-Hidroxiindolacético (5-HIAA), na urina canina

Objetivos A serotonina (5-hidroxitriptofano), implicada em várias doenças caninas, tem uma meia-vida muito curta no soro. A concentração urinária de seu produto de degradação, ácido 5-hidroxiindolacético, após jejum de 8 horas, é uma medida mais confiável da serotonina circulante em humanos. Este estudo teve como objetivo validar um ensaio ELISA comercialmente disponível para medir as concentrações de ácido 5-hidroxiindolacético na urina canina, comparando o desempenho analítico com o padrão ouro cromatografia líquida associada à espectrometria de massas em tandem Métodos A urina foi coletada de 26 cães submetidos a investigações diagnósticas de rotina em um centro de referência e rapidamente processada e armazenada antes do teste para ácido 5-hidroxiindolacético usando os dois métodos. Regressão de Deming e análises de Bland-Altman foram usadas para comparar os resultados entre os dois métodos Resultados O ELISA demonstrou precisão e repetibilidade aceitáveis (coeficiente de variação <20%). Houve boa concordância entre os dois métodos (viés 0,92 µmol/L; limites de concordância de 95% -6,44 a 8,29 µmol/L), embora o ELISA não tenha sido testado em valores próximos ao limite superior da faixa analítica declarada. O ELISA provavelmente é muito confiável em baixas concentrações, mas pode exceder limites aceitáveis de erro em concentrações altas. Significado clínico Um ELISA comercialmente disponível foi validado para medir ácido 5-hidroxiindolacético na urina. Este método menos invasivo que a coleta de sangue para serotonina deve fornecer uma indicação mais confiável das concentrações séricas de serotonina a longo prazo. Mais estudos com cães normais e doentes são necessários para confirmar esses achados antes de sua aplicação clínica.