Em células vivas, investigar as interações proteína-proteína (PPIs) com resolução de célula única fornece insights críticos sobre os mecanismos regulatórios endógenos subjacentes aos comportamentos celulares heterogêneos, como migração e proliferação. Técnicas convencionais de detecção de PPI em células vivas, que dependem da entrega de plasmídeos rotulados com proteínas fluorescentes de alto peso molecular em grandes populações celulares, são limitadas por baixa eficiência de entrega e capacidade analítica inadequada de célula única. Para abordar esses problemas, relatamos "Pixar", para exame de interação proteica e monitoramento de comportamento em tempo real. Esta plataforma permite a detecção eficiente de PPI em células vivas através da entrega baseada em campo elétrico focado de plasmídeos de proteínas rotuladas com peptídeos e sondas específicas (tanto a eficiência de entrega quanto a viabilidade celular > 90%), evitando a interferência estérica associada a abordagens de rotulagem volumosas convencionais. Sua matriz de captura de célula única de alta vazão permite o perfil dinâmico da interação proteica AKT-mTOR associada ao tumor na regulação da migração e proliferação celular heterogênea em milhares de células individuais. O sistema Pixar estabelece uma estratégia versátil para explorar a função proteica e os fenótipos comportamentais celulares com precisão de célula única.
Liu et al. (Tue,) estudaram esta questão.