Sonda Quimiluminescente Fosforilada Baseada em Spiro-ciclobutil-fenoxi-dioxetano para Detecção In Situ de Fosfatase Alcalina Ativada por Luz

A fosfatase alcalina (ALP) desempenha papéis biológicos importantes para muitas espécies vivas, incluindo bactérias. Aqui, desenvolvemos uma sonda para ALP (CL-A1) usando a desfosforilação de uma espécie quimiluminescente ativada por luz in situ baseada em um esqueleto de dioxetano substituído por spiro-ciclobutano. Uma oxidação sequencial induzida por luz e a desfosforilação mediada pela ALP do CL-A1 geraram rapidamente intensa quimiluminescência (CL), que foi mais forte do que a dos substratos comerciais de CL AMPPD e APS-5 testados na presença de um intensificador de sinal. A análise utilizando cepas de Escherichia coli confirmou a aplicabilidade do CL-A1 para a detecção sensível da atividade endógena da ALP usando ativação por luz in situ.