A DNA Polimerase ε da Levedura Participa na Replicação da Fita Líder do DNA

Múltiplas DNA polimerases participam na replicação das fitas líder e retardada do genoma nuclear eucariótico. Embora tenham se passado 50 anos desde a descoberta da primeira DNA polimerase, a identidade da principal polimerase utilizada para a replicação da fita líder é incerta. Construímos um derivado da DNA polimerase epsilon da levedura que mantém alta atividade de replicação, mas apresenta fidelidade de replicação fortemente reduzida, particularmente para incompatibilidades de timidina-desoxitimidina 5'-monofosfato (T-dTMP), mas não para adenina-desoxiadenosina 5'-monofosfato (A-dAMP). Cepas de levedura com este alelo da DNA polimerase epsilon apresentam taxas elevadas de mutações por substituição de T por A. A posição e a taxa dessas substituições dependem da orientação do repórter mutacional e sua localização relativa às origens de replicação do DNA, revelando um padrão que indica que a DNA polimerase epsilon participa da replicação da fita líder do DNA.