Sensor Eletroquímico para Detecção Multiplexada de Biomarcadores

OBJETIVO: O ensaio multiplexado de biomarcadores no ponto de atendimento é um objetivo difícil para o diagnóstico molecular. DESENHO EXPERIMENTAL: Aqui, relatamos um sensor eletroquímico (EC) para detecção de câncer oral baseado na detecção simultânea de dois biomarcadores salivares: mRNA de interleucina (IL)-8 e proteína IL-8. RESULTADOS: Em modo multiplexado, o limite de detecção do mRNA de IL-8 salivar chega a 3,9 fM e 7,4 pg/mL para a proteína IL-8 na saliva. O ensaio multiplexado desses dois biomarcadores diretamente em 28 amostras de saliva de pacientes com câncer e 28 controles pareados mostrou diferença significativa entre os dois grupos. Pela análise da curva ROC, o sensor EC apresentou cerca de 90% de sensibilidade e especificidade para ambos, mRNA de IL-8 e proteína IL-8, muito próximos dos dados medidos por ensaios tradicionais (ELISA e PCR) com o mesmo conjunto de saliva. A combinação do mRNA e proteína de IL-8 mostrou melhor AUC em comparação com biomarcador único. CONCLUSÕES: Demonstramos, pela primeira vez, a detecção multiplexada simultânea de biomarcadores salivares de mRNA e proteína usando sensor EC no ponto de atendimento.