Identificação de Genes Potencialmente Envolvidos na Ruptura de Placas Ateroscleróticas Humanas

Embora a ruptura de uma placa aterosclerótica seja a principal causa de oclusão vascular aguda, os mecanismos moleculares exatos subjacentes a esse processo ainda são pouco compreendidos. Neste estudo, utilizamos a hibridização subtrativa por supressão para fazer um inventário dos genes diferencialmente expressos em placas humanas estáveis e rompidas em preparação integral. Duas bibliotecas foram geradas, uma contendo 3000 clones regulados positivamente e outra contendo 2000 clones regulados negativamente em placas rompidas. A análise macroarray de 500 clones escolhidos aleatoriamente mostrou expressão diferencial de 45 clones. Entre os 25 clones que mostraram pelo menos uma diferença de 2 vezes na expressão estavam o gene perilipina, regulado positivamente em placas rompidas, e os genes codificadores da fibronectina e da cadeia lambda de imunoglobulina, que foram regulados negativamente em placas rompidas. Análise por transcrição reversa seguida de reação em cadeia da polimerase em 10 placas rompidas individuais e 10 placas estáveis individuais mostrou uma consistência marcante de expressão para os clones SSH6, presentes em 8 placas rompidas e 2 estáveis, e perilipina, expressa em 8 placas rompidas e completamente ausente em placas estáveis. Estudos de localização do mRNA e da proteína perilipina revelaram expressão em células ao redor dos clivagens de colesterol e em células espumosas de placas ateroscleróticas rompidas. Nenhuma expressão foi observada em artérias não doentes, e apenas algumas células na região do ombro de placas estáveis testaram positivo para perilipina. Concluindo, este estudo mostra que é possível identificar genes diferencialmente expressos em preparações integrais de placas ateroscleróticas estáveis ou rompidas. Essa abordagem pode revelar vários reguladores potenciais da desestabilização da placa.