多光谱成像用于定量及特定区室免疫浸润，揭示区分肺癌患者的独特免疫特征

通过免疫组织化学（IHC）对免疫标志物进行半定量评估在描述癌症免疫反应多样性方面存在显著局限性。因此，我们评估了一种基于荧光的多重免疫组织化学方法，结合多光谱成像系统，在非小细胞肺癌（NSCLC）环境中原位定量免疫浸润。包含57例NSCLC的组织微阵列用针对CD8、CD20、CD4、FOXP3、CD45RO和泛细胞角蛋白的抗体染色，并在上皮和基质区室中对免疫细胞进行定量。结果与传统IHC进行比较，并与对应的RNA测序（RNAseq）表达值相关联。我们发现淋巴细胞的视觉和数字定量在CD45RO（相关系数：r=0.52）、FOXP3（r=0.87）、CD4（r=0.79）、CD20（r=0.81）和CD8（r=0.90）细胞中有较强相关性。数字定量与RNAseq数据的相关性（0.35-0.65）与视觉定量（0.38-0.58）相当或更好。五种免疫标志物信号的组合使得进一步识别和定位淋巴细胞亚群成为可能。基于空间分布（调节性CD8+ T细胞与癌细胞间距离）或淋巴细胞亚类之间的关系（如细胞毒性/调节性细胞比例）的免疫细胞浸润特定模式与患者预后相关。总之，该基于单一组织切片的荧光多重免疫组化方法能够可靠地定量和定位癌症组织中的免疫细胞。将此技术应用于临床活检，可提供免疫浸润的基础表征，以指导免疫治疗时代的临床决策。版权©2017英国及爱尔兰病理学会。由John Wiley & Sons出版。