使用高通量循环免疫荧光方法对单细胞进行高重复式成像

单细胞分析揭示了基于群体研究无法发现的细胞生理学方面，特别是在能够关联多种信号传导、分化及细胞命运标志物水平的高重复式方法如质谱流式细胞术（CyTOF）中。免疫荧光（IF）显微镜增加了细胞形态和微环境的信息，这是流式技术所无法获得的，但传统IF的多重性有限。这促使发展需要专用仪器、特殊试剂或专有协议且难以在大多数实验室复制的成像方法。本文报道了一种公开领域的方法，通过循环免疫荧光（CycIF）实现高重复式单细胞IF，这是一种简单且多功能的程序，四色染色与荧光基团的化学灭活交替进行，逐步构建多通道图像。由于CycIF使用标准试剂和仪器，且成本与传统IF相当，适用于高通量测定和筛选应用。