Resumen C036: La inhibición vertical de la vía de autofagia potencia la sensibilización a la inhibición de la vía RAS MAPK en adenocarcinoma ductal pancreático

Resumen El crecimiento del PDAC se caracteriza por dependencias tanto en la señalización de KRAS mutante como en la autofagia. Nuestro grupo y otros demostraron previamente que la inhibición de la vía RAF/MEK/ERK en PDAC induce una dependencia aumentada de la autofagia, un proceso metabólico de captura de nutrientes mediante el cual se reciclan componentes celulares en tiempos de estrés nutricional. La inhibición combinada de la vía ERK MAPK y la autofagia inhibió el crecimiento de múltiples modelos preclínicos de PDAC. Basado en estos hallazgos, la inhibición combinada de ERK/MEK y la hidroxicloroquina (HCQ) está actualmente en evaluación clínica (NCT03825289, NCT04386057). Sin embargo, ya se ha descrito resistencia a esta combinación. Para identificar sensibilizadores al tratamiento con CQ, nuestro laboratorio realizó una pantalla de pérdida de función mediada por CRISPR-Cas9 usando una biblioteca de sgRNA dirigida a genes asociados con vías de señalización del cáncer. Sorprendentemente, identificamos múltiples genes relacionados con la autofagia, indicando que la inhibición concurrente de dos nodos de la vía de autofagia podría ser un método más eficaz para inhibir la autofagia en PDAC. Por ejemplo, identificamos PIK3C3, el gen que codifica VPS34, una proteína esencial para la nucleación de autofagosomas, como un posible sensibilizador al tratamiento con CQ. La inhibición de VPS34 con el compuesto SAR405 resultó en una disminución del flujo autofágico y en un deterioro de la proliferación. Además, la inhibición de VPS34 sensibilizó las células al tratamiento con CQ, provocando una reducción adicional en la proliferación. Estos resultados nos llevaron a plantear la hipótesis de que la inhibición de ULK1, una quinasaserina/treonina crítica para la iniciación de la autofagia, también podría sensibilizar las células de PDAC al tratamiento con CQ. Encontramos que la inhibición de ULK1 redujo aún más los efectos antiproliferativos mediados por CQ. Además, el tratamiento con inhibidores de ULK1 y VPS34 sensibilizó las células a la inhibición de PIKfyve con apilimod, un inhibidor química y mecanísticamente distinto de la fase de terminación de la vía autofágica. Estudios previos han indicado que la inhibición de la autofagia por sí sola no es una vía terapéutica viable para el tratamiento del PDAC. Por lo tanto, determinamos si la inhibición vertical de la vía de autofagia mejora la eficacia de la inhibición combinada de la vía RAS y la autofagia. Encontramos que tanto la inhibición de VPS34 como la de ULK1 pueden disminuir el flujo autofágico inducido por inhibidores de RAS. Finalmente, la inhibición vertical de la vía autofágica mediante la inhibición de VPS34 y CQ sensibilizó las células de PDAC a la inhibición de RAS para reducir aún más la proliferación del PDAC. Los estudios en curso y futuros están dirigidos a dilucidar el mecanismo que conduce a la reducción de la proliferación de terapias combinadas anti-autofagia e inhibidores de RAS, así como a comprender mecanísticamente el efecto de la inhibición de la autofagia en múltiples nodos sobre el flujo autofágico. Formato de citación: Mallory K Roach, Jonathan M DeLiberty, Elyse G Schechter, Runying Yang, Noah L Pieper, Clint A Stalnecker, Kirsten L Bryant. Vertical inhibition of the autophagy pathway enhances sensitization to RAS MAPK pathway inhibition in pancreatic ductal adenocarcinoma abstract. En: Proceedings of the AACR Special Conference in Cancer Research: Advances in Pancreatic Cancer Research; 2024 Sep 15-18; Boston, MA. Philadelphia (PA): AACR; Cancer Res 2024;84 (17 Suppl₂): Abstract nr C036.