Validación de un ensayo ELISA para la medición del metabolito de serotonina, ácido 5-hidroxiindolacético (5-HIAA), en orina canina

Objetivos La serotonina (5-hidroxitriptófano), implicada en varias enfermedades caninas, tiene una vida media muy corta en suero. La concentración urinaria de su producto de degradación ácido 5-hidroxiindolacético tras un ayuno de 8 horas es una medida más fiable de la serotonina circulante en humanos. Este estudio tuvo como objetivo validar un ensayo ELISA comercialmente disponible para medir las concentraciones de ácido 5-hidroxiindolacético en orina canina, comparando el rendimiento analítico con el estándar de oro de cromatografía líquida acoplada a espectrometría de masas en tándem. Métodos Se recogió orina de 26 perros sometidos a investigaciones diagnósticas rutinarias en un centro de referencia, la cual fue procesada rápidamente y almacenada antes de su análisis para ácido 5-hidroxiindolacético utilizando ambos métodos. Se emplearon regresión Deming y análisis de Bland-Altman para comparar los resultados entre los dos métodos. Resultados El ELISA mostró una precisión y repetibilidad aceptables (coeficiente de variación <20%). Hubo buen acuerdo entre los dos métodos (sesgo 0,92 µmol/L; límites de acuerdo del 95% -6,44 a 8,29 µmol/L), aunque el ELISA no fue evaluado en valores cercanos al límite superior del rango de medición analítica declarado. El ELISA probablemente sea muy fiable en concentraciones bajas pero puede superar los límites aceptables de error en concentraciones altas. Significado clínico Se validó un ELISA comercial disponible para medir ácido 5-hidroxiindolacético en orina. Este método, menos invasivo que la extracción sanguínea para serotonina, debería proporcionar una indicación más fiable de las concentraciones séricas de serotonina a largo plazo. Se necesitan más estudios en perros normales y enfermos para confirmar estos hallazgos antes de su aplicación clínica.