Para abordar los problemas de complejidad operativa, asociación de larga duración y dependencia de equipos especializados con los métodos de detección existentes para Vibrio parahaemolyticus, este estudio estableció un método de detección rápida para V. parahaemolyticus en productos acuáticos exportados basado en la tecnología de Amplificación Enzimática de Recombinasa (ERA) desarrollada a nivel nacional. Para dirigirse al gen de hemolisina termolábil (tlh) y al gen de proteína reguladora de virulencia regulada por hierro (irgB) de V. parahaemolyticus, se diseñaron y seleccionaron cebadores y sondas de ERA altamente específicos. Se desarrollaron dos plataformas de detección, un método colorimétrico y un método fluorescente. Los resultados de la validación del método mostraron que este sistema de detección logró una amplificación específica para las 30 cepas de V. parahaemolyticus probadas, sin observarse reactividad cruzada con otras 30 bacterias patógenas comunes transmitidas por alimentos. La sensibilidad de detección para ambos métodos, fluorescente y colorimétrico, alcanzó 10−1 ng/μL, con un límite de detección mínimo de 10 UFC/25 g para muestras contaminadas artificialmente. Todo el proceso de detección, incluida la preparación de la muestra, requiere solo aproximadamente 20 minutos, lo que es significativamente más rápido que el cultivo tradicional (24–72 h) o incluso los métodos de PCR convencionales. La validación colaborativa en cinco laboratorios independientes confirmó una excelente reproducibilidad, con un acuerdo inter-laboratorio que arrojó un coeficiente Kappa de 0.98. El método ERA opera a una temperatura baja y constante (37–39 °C), eliminando la necesidad de ciclos térmicos. Cuando se combina con dispositivos de amplificación isotérmica portátil y lectura visual (colorimétrica), ofrece una ventaja distintiva en términos de velocidad, rentabilidad y adecuación para entornos con recursos limitados o de campo en comparación con las plataformas basadas en PCR o cultivos existentes. Este método es sencillo de operar, rápido, sensible y altamente adecuado para aplicaciones en el lugar, proporcionando una solución técnica confiable y práctica para la detección rápida y el monitoreo de riesgos de V. parahaemolyticus en productos acuáticos exportados.
Liang et al. (Sat,) estudiaron esta cuestión.