Las células mTEC fueron sometidas a transfección con siRNA-2 o siRNA-NC. El ARN se enriqueció primero utilizando perlas magnéticas conjugadas con Oligo (dT), después de lo cual el mARN fue fragmentado aleatoriamente por la adición de Buffer de Fragmentación. Tomando el mARN fragmentado como plantilla, se sintetizaron secuencialmente cDNA de cadena simple y cDNA de cadena doble, seguido de la purificación de cDNA. El cDNA de doble cadena purificado fue sometido a reparación de extremos, adición de cola A y ligadura de adaptadores de secuenciación; posteriormente, se realizó la selección de tamaño de fragmento utilizando perlas AMPure XP. Finalmente, se obtuvo la biblioteca de cDNA a través de enriquecimiento por PCR. Las bibliotecas generadas fueron examinadas por Qsep400 y sometidas a secuenciación en un instrumento Illumina HiSeq2000. A continuación, se obtuvo la data limpia después de filtrar la data cruda y se alineó con el genoma de referencia del ratón mm10.
徐明慧(Minghui Xu) (Jue,) estudió esta cuestión.