Abstract B014: Auswirkungen einer chronischen Behandlung mit Histondeacetylase-Inhibitoren auf Ewing-Sarkom-Zellen heben Ret als potenzielles therapeutisches Ziel hervor

Abstract Histondeacetylase-Inhibitoren (HDACi) wirken vielfältig auf Krebszelllinien, einschließlich der Hemmung des Zellwachstums in vitro und von menschlichen Tumor-Xenotransplantaten in vivo, und zeigten eine moderate therapeutische Wirksamkeit bei einer Untergruppe von menschlichen Malignomen. Wir haben zuvor gezeigt, dass eine chronische Behandlung von Darmkrebszellen mit HDACi zu einer Anpassung führen kann, die mit deutlichen Abnahmen des Zellwachstums, der Koloniebildung und Tumorgenität sowie umfangreichen Veränderungen der Genexpression einhergeht, was auf eine Abschwächung des malignen Phänotyps und einen möglichen neuartigen Einsatz dieser Wirkstoffe hinweist. Das Ewing-Sarkom (ES), wahrscheinlich abgeleitet von einer sehr primitiven, mesenchymal verwandten Zelle, ist eine aggressive Kinderkrebserkrankung, die oft therapieresistent ist. ES-Zellen enthalten klassischerweise die charakteristische EWS-FLI1-Translokation und das Fusionsgen, das bekanntermaßen Histonmodifikationen und epigenetische Regulation dramatisch verändert. Wir stellten die Hypothese auf, dass eine chronische Behandlung von ES-Zelllinien mit HDACi zu bedeutenden Veränderungen im Genexpressionsprogramm der ES-Zellen führt, die ihren malignen Phänotyp verändern könnten. Wir behandelten die ES-Zelllinie A673, die das EWS-FLI-Fusionsgen enthält, entweder mit schrittweise zunehmenden Mengen von Entinostat (selektiver HDACi Klasse I, bis zu 1,5 µM) oder mit einer Einzeldosis-Chronikbehandlung (1,5 µM). Wir beobachteten behandlungsassoziierte dramatische Reduktionen der Wachstumsraten, Koloniebildung, ankerunabhängiges Wachstum sowie wesentliche Veränderungen in Genexpression (RNA-Sequenzierung, RT-qPCR) und Chromatinorganisation (ATAC-seq). Die Analyse der Genexpression zeigte Hunderte unterschiedlich exprimierter Gene mit Veränderungen, die sowohl mit Differenzierung entlang neuraler als auch mesenchymaler Pfade in Zusammenhang stehen, konsistent mit beobachteten Veränderungen in linienbestimmenden Transkriptionsfaktoren der Familien Nkx, Sox und Pax. Weitere Gene mit veränderten Expressionsniveaus umfassten potenzielle neue therapeutische Ziele wie die Tyrosinkinase RET, deren Expression auf RNA- und Proteinebene reduziert war, verbunden mit verringerter Chromatinzugänglichkeit. Wir vermuteten, dass Ret eine Rolle im malignen Phänotyp von ES spielt und untersuchten, ob die durch HDACi induzierte Reduktion der Ret-Expression A673-Zellen für Ret-Inhibitoren sensitisiert. Die Ko-Behandlung von A673-Zellen mit Entinostat führte zu einer mehr als doppelt so hohen Sensitivität gegenüber Cabozantinib, einem Tyrosinkinase-Inhibitor, der eine ausgewählte Gruppe von Tyrosinkinasen einschließlich Ret hemmt. Wir charakterisieren weiterhin die Rolle von Ret als potenzielles therapeutisches Ziel und als Vermittler des malignen Phänotyps von ES-Zellen mittels CRISPR-vermittelter Geneditierung. Danksagung: Diese Arbeit wurde unterstützt durch Fördermittel des NJ Pediatric Hematology and Oncology Center of Excellence des Rutgers Cancer Institute. Zitationsformat: Hsin-Ching Lin, Erica Raj, Luis Sanchez-Gonzalez, Aisling Byrne, Shin-Heng Chiou, Arnold B Rabson. Effects of chronic histone deacetylase inhibitor treatment on Ewing sarcoma cells highlight Ret as a potential therapeutic target abstract. In: Proceedings of the AACR Special Conference in Cancer Research: Discovery and Innovation in Pediatric Cancer— From Biology to Breakthrough Therapies; 2025 Sep 25-28; Boston, MA. Philadelphia (PA): AACR; Cancer Res 2025;85 (18Suppl₂): Abstract nr B014.