Resumen 1069: Nuevas Aproximaciones para Desglosar la Composición del Trombosis Humano

Introducción: La formación de trombos es un contribuyente clave al accidente cerebrovascular isquémico y a las enfermedades cardiovasculares. Las variaciones en la composición del trombo que involucran plaquetas, fibrina y leucocitos juegan un papel fundamental en la fisiopatología, impactando los resultados clínicos. Comprender su carácter y la interacción con las Trampas Extracelulares de Neutrófilos (NETs) es clínicamente vital debido a la respuesta al tratamiento y el resultado. Este estudio introduce la microscopía de hoja de luz y la holotomografía para desglosar la composición del coágulo, con el objetivo de mejorar la comprensión clínica de la trombosis. Desentrañar estas complejidades promete intervenciones específicas y mejores resultados para los pacientes. Objetivos: Este estudio tuvo como objetivo mejorar nuestra comprensión de la composición del trombo sanguíneo humano mediante un enfoque novedoso que utiliza la microscopía de hoja de luz y la holotomografía. Métodos: Las muestras de trombos humanos se obtuvieron mediante trombectomía mecánica de pacientes con accidente cerebrovascular isquémico agudo. Para acceder a la estructura del trombo, las muestras se aclararon mediante un sistema de aclaramiento tisular rápido, y se obtuvieron imágenes con un microscopio de hoja de luz utilizando CitH3, CD45, P-selectina y fibrina. Las imágenes de holotomografía se obtuvieron de trombos cortados en crio a un grosor de 5 μm y teñidos con DAPI y CitH3. La holotomografía proporcionó información cuantitativa sobre el índice de refracción de los componentes del trombo. Se realizó un análisis comparativo con métodos de imagen tradicionales para evaluar las ventajas de los enfoques novedosos. Resultados: Los resultados revelaron una visualización integral del arreglo espacial de la composición del trombo humano a través de imágenes de microscopía de hoja de luz. La holotomografía adquirió con éxito una imagen tridimensional de una muestra de sección del trombo. Las imágenes de HT se utilizaron para distinguir cualitativamente las diferencias en la distribución del RI de neutrófilos por NETosis y las diferencias en los valores del RI dentro de la población de células inmunitarias. Conclusión: Este estudio demuestra la eficacia de combinar la microscopía de hoja de luz y la holotomografía para desglosar de manera integral la composición del trombo humano. La integración de estas técnicas avanzadas de imagen proporciona una comprensión de la trombosis, superando las limitaciones de los métodos tradicionales.