Abstract 4112: Identifizierung von Th1-spezifischen Epitopen aus nicht-mutierten KRAS-Läsionen für vorgefertigte Krebsimpfstoffe

Abstract Hintergrund KRAS ist entscheidend für Zellwachstum, Differenzierung und Signalgebung. Mutationen im KRAS-Gen (d. h. Kodon 12 oder 13) werden häufig mit der Entstehung und dem Fortschreiten von Krebs, insbesondere Lungen-, kolorektalen und Pankreaskrebs, in Verbindung gebracht. Kürzlich wurde festgestellt, dass die Krebsimpfstoffforschung und klinische Studien zum KRAS-Targeting bei bestimmten Tumortypen durchgeführt wurden und Impfstoffansätze empfohlen werden, weiter voranzuschreiten. Es ist bekannt, dass die tumorspezifische Wirksamkeit von Krebsimpfstoffen auf der Auswahl von Th1-Epitopen beruht. Während das Tumorwachstum nach der Immunisierung mit nicht ausgewählten Epitopen (einschließlich Vollsequenz) fortbestehen kann, kann eine Immunisierung mit einem hochselektierten, Th1-spezifischen Epitope-Impfstoff zur Tumorrückbildung führen, indem die Aktivierung immuninhibitorischer Zellen unterdrückt wird. Die Th-Vac®-Entdeckungsplattform verwendet eine Kombination aus In-silico-, In-vitro- und In-vivo-Studien, um Th1-spezifische Epitope präzise zu identifizieren. Sie besteht aus zwei Modulen: Modul 1 (In-silico) und Modul 2 (In-vitro und Wirksamkeitsbewertung). Ziel ist es, MHC-Klasse-II-Epitope zu identifizieren, die spezifisch für Antigene von CD4+ T-Zellen sind und die günstigste Bindungsaffinität über verschiedene Allele hinweg aufweisen. Th1-spezifische Epitope-Impfstoffe zielen darauf ab, die T-Zell-Immunität gegen Tumorantigene zu verstärken und aufrechtzuerhalten und so das Fehlen einer präzisen T-Zell-Antwort oder bestehende Toleranz im immunsuppressiven Tumormikromilieu (TME) zu überwinden. Diese Studie zielte darauf ab, Th1-spezifische Epitope für einen KRAS-Impfstoff zu erforschen, der potenziell in zahlreichen durch KRAS-Mutationen angetriebenen Krebsarten wirksam ist. Methoden Peptidsequenzkandidaten mit hoher potenzieller MHC-Klasse-II-Bindungsaffinität wurden umfassend mittels Modul 1 (ASEP-Programm) vorhergesagt. Alle in ASEP ausgewählten Peptide wurden als 15er-Segmente synthetisiert. Jedes Peptid wurde auf Immunogenität mittels ELISpot- und/oder FACS-Analyse in Modul 2 (2a für in vitro und 2b für in vivo immunologische Bewertung) der Th-Vac®-Plattform evaluiert. Insbesondere wurde in Modul 2b die Immunogenität anhand eines 38-mer Peptids bewertet, das durch Kombination von fünf überlappenden Peptiden, die in 2a ausgewählt wurden, entstand. Diese Art der Immunogenitätsbewertung erfolgte unter Verwendung von Typ-1- und/oder Typ-2-Cytokinen, die von CD4+ T-Zellen produziert wurden. Ergebnisse In der ASEP-Vorhersage wurden zwölf Peptide als potenzielle Kandidaten mit hoher Affinität zu MHC Klasse II ausgewählt, die aus verschiedenen Läsionen häufiger KRAS-Mutationen stammen. In Modul 2 unter Verwendung von ELISpot- und FACS-Analysen wurden schließlich zwei Epitope (nicht-mutierte Sequenzen) als Th1-spezifische Epitope anhand der Typ-1-T-Zell-Antwort ausgewählt. Schlussfolgerung Im Gegensatz zu früheren Impfstoffen, die mutierte Läsionen verwendeten, befinden sich in dieser Studie zwei nicht-mutierte Th1-spezifische Epitope derzeit in Wirksamkeitsstudien in vivo als Mono- und Kombinationsregime bei bestimmten Tumortypen. Darüber hinaus wurde die Th-Vac®-Plattform hinsichtlich ihrer Leistungsfähigkeit vollständig validiert, und ihre Anwendung könnte über Krebsimpfstoffe hinaus erweitert werden.