Resumo LB138: Sinalização baseada em células natural killer em KIR-CAR T direcionado para EGFR supera déficits funcionais de CAR T baseados em CD3 para eliminar glioblastomas resistentes in vivo

Resumo Glioblastoma (GBM) é o câncer cerebral primário mais comum em adultos, com um prognóstico de sobrevivência de 15-18 meses apesar do tratamento padrão de ressecção, quimioterapia e radioterapia. Ensaios clínicos recentes investigando células T autólogas com receptor quimérico de antígeno (CAR) direcionadas para variantes do receptor do fator de crescimento epidérmico (EGFR) em GBM por meio de fragmentos únicos de cadeia variável (scFv) recombinados com co-estimulação 41BB e ativação CD3ζ mostraram evidências radiográficas encorajadoras de reduções tumorais precoces, dentro de dias após o tratamento com CAR T. Infelizmente, essa função antitumoral foi de curta duração, com crescimento tumoral geralmente ocorrendo dentro de dias a semanas, possivelmente atribuído à rápida perda da função das células T devido à exaustão ou perda do antígeno alvo. Na tentativa de evitar a exaustão da sinalização CAR baseada em CD3 e prolongar a função antitumoral do CAR T, o CAR recombinante de cadeia única baseado em CD3ζ foi substituído por um sistema de sinal dividido mais fisiológico derivado de células natural killer (NK), utilizando o receptor imune semelhante a imunoglobulina do tipo killer (KIR) e a proteína ativadora DNAX de 12 kDa (DAP12) para permitir um ciclo mais natural de ativação/desativação celular ao engajar e desengajar a célula alvo. O CAR de segunda geração direcionado para EGFR/EGFRvIII com cadeia única 41BB-CD3ζ foi substituído por sinalização multi-cadeia KIR/DAP12, e células CAR e KIR T foram comparadas in vitro quanto à especificidade de reconhecimento, função citolítica, secreção de citocinas e fenótipo de diferenciação das células T. A eficácia in vivo foi avaliada em modelos de xenotransplante murino GBM resistentes a CAR em camundongos imunocomprometidos NOD/SCID/gamma-chain-/- (NSG), onde o tamanho do tumor foi avaliado por imagens in vivo e medições com paquímetro, e sobrevida por gráficos de Kaplan–Meier. Após transdução lentiviral e expansão ex vivo, as células KIR-CAR T exibiram um fenótipo mais semelhante a células naïve, com células de memória efetora reduzidas em comparação com CAR T baseados em CD3. In vitro, ambos os formatos de sinalização CAR e KIR conferiram especificidade alvo comparável, citotoxicidade, ativação de células T e liberação de citocinas. Em contraste, in vivo, as células KIR-CAR T superaram repetidamente os CARs 41BB-CD3ζ, com o tratamento mais eficaz entregue por um scFv que direciona múltiplas variantes tumorais associadas ao EGFR, demonstrando regressões tumorais superiores, incluindo respostas antitumorais completas e aumento da sobrevida. Com a mesma especificidade de direcionamento, produção semelhante de citocinas in vitro e impacto funcional antitumoral significativamente maior e prolongado in vivo, o EGFR-KIR-CAR tem potencial para rápida tradução clínica para superar as limitações do CAR T de cadeia única baseado em CD3 no tratamento de pacientes com GBM. Financiado pela bolsa NIH DP2CA174502 (LAJ). Formato da citação: Jun Xu, Radhika Thokala, Yibo Yin, Chong Xu, Alina C. Boesteanu, Alexandria P. Cogdill, Zev A. Binder, Logan Zhang, Jiasi Vicky Zhang, Enxiu Wang, Carl H. June, Donald M. O'Rourke, Michael C. Milone, Laura A. Johnson. Natural killer cell-based signaling in EGFR-targeted KIR-CAR T overcomes CD3-based CAR T functional deficits to eliminate resistant glioblastomas in vivo abstract. In: Proceedings of the American Association for Cancer Research Annual Meeting 2026; Part 2 (Late-Breaking, Clinical Trial, and Invited Abstracts) ; 2026 Apr 17-22; San Diego, CA. Philadelphia (PA): AACR; Cancer Res 2026;86 (8Suppl): Abstract nr LB138.